一、正確使用發(fā)酵罐

發(fā)酵罐滅菌之后，就可以用來培養(yǎng)細(xì)菌了。

1.接上pH電極的插頭, 接通底部冷卻水管和空氣出口處的冷凝器上的冷卻水管, 將各硅酮管置于相應(yīng)的蠕動(dòng)泵上。

2.把攪拌馬達(dá)置于攪抖聯(lián)動(dòng)裝置上。

3.把光標(biāo)調(diào)到“Temperature”檔,設(shè)定一個(gè)合適的溫度。

4.校正溶氧電極的滿刻度。

1)利用光標(biāo)將攪拌速度調(diào)至最大轉(zhuǎn)速，一般為800 r/min,把通氣量調(diào)節(jié)到1.0 L Air/L medium/min(1VVM)。

2)調(diào)到calibration界面，光標(biāo)調(diào)至溶氧處，“span”檔,設(shè)定讀數(shù)為100，反復(fù)調(diào)節(jié)幾次，直至穩(wěn)定至100，轉(zhuǎn)至menu界面。

5.其他參數(shù)設(shè)定。把光標(biāo)調(diào)到Agit檔，設(shè)定最小值為200 r/min。把光標(biāo)調(diào)到DO檔,設(shè)定參數(shù)為合適的值, 調(diào)整為與溶氧偶聯(lián)檢測(cè)。把光標(biāo)調(diào)到Agit檔，設(shè)定最大值為800 r/min;把光標(biāo)調(diào)到pH檔,設(shè)定參數(shù)為7.0，調(diào)整為自動(dòng)檢測(cè);接上酸(堿)瓶，并打開自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng)。

6.接種：發(fā)酵罐的接種就是將蘸滿乙醇的棉花球纏在接種口外套上, 點(diǎn)燃火焰以前將接種口的蓋子旋松。然后點(diǎn)燃發(fā)酵罐上的棉花球, 取掉蓋子, 立即在火焰中加入各組分培養(yǎng)基和種子液。最后將蓋子浸泡在乙醇中, 接種后, 用攝子將蓋子準(zhǔn)確放回原位, 旋緊。

7.打開記錄實(shí)驗(yàn)過程的專用軟件。

8.發(fā)酵過程中，每隔兩小時(shí)記錄溶氧、轉(zhuǎn)速、測(cè)定OD600，取樣品5 mL儲(chǔ)存進(jìn)行各種分析檢測(cè)。

認(rèn)真的對(duì)照上面的步奏進(jìn)行，發(fā)酵缸的操作就順利完成了。

二、發(fā)酵罐的清洗的注意事項(xiàng)

發(fā)酵罐的清洗是非常重要的，但是很多人不太會(huì)，不但沒有清洗干凈，反而可能導(dǎo)致更惡劣的后果。

1.發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)生大量的蛋白質(zhì)、酒花樹脂、多糖、酵母等有機(jī)物和草酸鈣、硫酸鹽等無機(jī)物，在發(fā)酵罐清空后，有機(jī)物和無機(jī)物污物附著在罐壁上，呈黃褐色。酒石數(shù)量多時(shí)，表面呈現(xiàn)白色，如同鹽堿地表皮一樣，無機(jī)物與有機(jī)物相互交織在一起。

清洗時(shí)使用火堿，只是對(duì)去除有機(jī)物有作用，清洗溫度達(dá)到80℃以上，才會(huì)有較好的清洗效果。

清洗時(shí)采用單一的硝酸進(jìn)行清洗，只是對(duì)無機(jī)物有一定效果，對(duì)有機(jī)物幾乎無效。而發(fā)酵罐壁所結(jié)污物為無機(jī)物和有機(jī)物的混合物，使用單一清洗劑清洗困難。因此，有的啤酒廠每年都會(huì)對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行一次大清洗，徹底清刷發(fā)酵罐。

2.發(fā)酵罐壁T541防腐層部分損壞，經(jīng)修補(bǔ)后，表面光潔度明顯下降，造成罐壁污物清洗困難。

3.洗罐器或洗球的磨損或堵塞，導(dǎo)致部分發(fā)酵罐清洗不徹底，污物積累較多。

諸多因素會(huì)致使發(fā)酵罐經(jīng)過幾年的使用后，會(huì)產(chǎn)生很多臟物質(zhì)，比如罐壁積累了一定量的污物，使用常規(guī)清洗工藝難以徹底清除。故每4至5年，可利用生產(chǎn)淡季對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行深度清洗。這是最好的方法。

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